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樟芝清除香菸萃取液之自由基及抑制平滑肌細胞氧化傷害

* : * : admin * : 2017-06-06 * : 8

教授 : 許世興; 楊新玲

研究生 : 陳政憲

校院名稱 : 朝陽科技大學

研究對象及範圍 : 芝清除香菸萃取液之自由基及抑制平滑肌細胞氧化傷害 

 

摘要

  第一部份

  吸煙會造成人體健康的危害,主要是香煙中含有大量的自由基以及活性氧分子 (ROS) ,導致人體內的抗氧化物質消耗而造成氧化傷害。因此若能增加體內抗氧化能力就能減少自由基或活性氧分子對人體的傷害,常見的抗氧化物例如維生素 C 、維生素 E 都是最常用來補充的抗氧化物質,本實驗中利用化學發光法 (chemiluminescence) 去分析香煙萃取液 (CSE) 中 ROS 的含量,並以樟芝發酵液作為抗氧化物,觀察加入 芝發酵液之後 ROS 的變化;實驗結果可以看出 芝發酵液具有清除香煙萃取液中的 ROS 功效,且有不錯的效果,因此樟芝在抗氧化方面也是一種很好的抗氧化物。

  第二部分

  吸煙容易導致粥狀動脈硬化,主要原因為 LDL 氧化最後形成泡沫細胞 ( foam cell ) 造成內皮損傷以及平滑肌增生,近來有研究指出平滑肌細胞凋亡也是造成粥狀動脈硬化的一個原因之一。本節實驗中採用大鼠平滑肌細胞 (A7r5) 探討樟芝發酵液對於加入香煙萃取液之後是否具有保護效果能夠延緩其凋亡。在 comet assay 實驗中發現,樟 芝發酵液具有保護的效果,且香煙萃取液可能會造成 SMC 凋亡。 western blotting 的實驗中, Bcl-2 加入香煙萃取液呈現減少且 NF-κB 也被活化,加入 芝發酵液後 Bcl-2 其表現量增加且 NF-κB 也被抑制, Bax 則變化不大。因此推測樟芝在預防平滑肌細胞的死亡具有其不錯的效果。

  第三部分
  吸煙一直被認為是導致的重要原因之一,已知香煙中的焦油態與氣態含有大量自由基,不但可誘發 LDL 中的多元不飽和脂肪酸產生氧化反應,也可使巨噬細胞被攝入內皮細胞中造成內皮細胞功能障礙、平滑肌增生與一連串的氧化反應,因而促進血管粥狀動脈硬化的發生。動脈粥狀硬化乃是一種慢性發炎疾病,其主要會出現在血管壁的損傷及血清中膽固醇的增加。樟芝 (Antrodia cinnamomea, AC) 相傳具有強抗氧化作用的功能,且對心臟血管疾病也具有預防的功能。本實驗採用 Apo E 剔除 (apo E knockout) 公鼠,分組後餵食( cigarette smoke extract, CSE )與樟芝發酵液,並分析其總膽固醇 (TC) 、三酸甘油脂 (TG) 含量以及 SOD 、 GPx 、 GRd 三種抗氧化酵素活性以及總抗氧化能力 TAS ,並且做切片染色以觀察小鼠動脈的損傷,以及樟芝對動脈硬化是否具有保護效果。
最後結果顯示出樟芝發酵液的確能夠提高 TAS 以及 SOD 、 GPx 、 GRd 的能力,並且可以降低總膽固醇、三酸甘油脂的濃度。